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¿Qué es un microscopio de campo oscuro?

El microscopio de campo oscuro es un tipo de microscopio óptico utilizado en cierto tipo de laboratorios. Tiene las mismas características que cualquier microscopio compuesto, con la diferencia de que en este se realiza una modificación en el condensador, antes de que la luz llegue a la muestra. Este tipo de microscopios permite aumentar el nivel de contraste, por lo que es posible observar ciertas características que con la microscopia de campo claro sería imposible.  

La microscopia de campo oscura es ideal cuando se desea revelar bordes o contornos, es perfecta para observar microorganismos como diatomeas, bacterias sin tinción, huesos, fibras, cabello, protozoarios y tejido, entre otras. También se pueden observar muestras no biológicas, como por ejemplo cristales, partículas coloidales, polvos, cerámica y secciones finas de polímeros. 

Funcionamiento de un microscopio de campo oscuro

En la microscopía de campo oscuro, existen dos tipos de iluminación en las que se basa su funcionamiento, la trans-iluminación y la epi-iluminación, la utilización de estas depende de lo que se quiera resaltar, por ejemplo, si se quieren observar partículas delgadas o si es necesario apreciar el borde de lo que se observa en la muestra. A continuación se explican ambos tipos: 

  • Transiluminación: se basa en el bloqueo de los rayos de luz antes de que estos lleguen al condensador, para ello se hace uso de algún dispositivo que impida el paso. Con este tipo de iluminación se puede observar estructuras o partículas muy delgadas. Se obtendrán imágenes relativamente brillantes que resaltan sobre un fondo negro. 
  • Epi-iluminación: en este caso se necesita que el microscopio tenga incluido un filtro  en forma de media luna para lograr que la luz sea oblicua. Con la iluminación oblicua las estructuras observadas tendrán un efecto de relieve, esto permite resaltar los bordes de partículas. Este tipo de iluminación es especialmente útil para muestras en suspensión. 

Usos de los microscopios de campo oscuro

Son especialmente útiles cuando se necesitan evaluar muestras sin generarles ningún daño o aplicar alguna tinción. Algunas bacterias, por ejemplo, necesitan de ciertos tintes, para poder observarse bajo el microscopio de campo claro, una variante es el uso de los  microscopios de campo oscuro, que permiten detallar ciertas características, esto los vuelve equipos muy útiles para analizar ciertos tipos de muestras clínicas. 

Con ellos también se pueden visualizar muestras vivas en suspensión, por ejemplo, ciertos microorganismos, de esta manera se pueden apreciar la pared celular o la capsula. En bioanálisis, son especialmente útiles, porque se puede observar el comportamiento de las células sanguíneas, sin necesidad de agregar algún reactivo adicional.

Ventajas y desventajas del microscopio de campo oscuro

El microscopio de campo oscuro presenta ciertas desventajas en comparación con el microscopio de campo claro, especialmente en la visualización de la muestra. Con el microscopio de campo oscuro es necesario preparar la muestra correctamente para que no quede muy gruesa, ya que de esta manera no se podría apreciar nada, por otro lado, la resolución es más baja y no se pueden observar estructuras internas. 

Sin embargo, esto no lo hace una mala elección, ya que todo depende del tipo de muestra que se vaya a analizar, por ejemplo, si se necesitan observar microorganismos vivos sin dañarlos o si solo se desea ver el contorno de ciertos organismos para lograr identificarlos, este equipo se vuelve una herramienta muy útil. 

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